1.2.2雌花开花动态及寿命
按东、南、西、北四个方向选择 ‘天源红’树冠外围中部40朵花进行挂牌标记,从未现蕾期开始,每天清晨记录一次,观察单花发育情况,直到花落为止,统计单花在不同发育阶段所需的天数。同时观测‘天源红’同一植株、同一新梢及同一花序上的单花开放顺序。另在四个方向选择树冠外围10个花序进行挂牌,同上进行观察,统计花序寿命。
1.2.3田间温度记录
在4月15日~5月15日,用杭州泽大仪器有限公司生产的ZDR-20智能数据记录仪每隔15 min自动采集一次田间大气温度(距地面1.7 m),从中找出每天的最高温和最低温,并以每天2:00,8:00,14:00和20:00四个时段的温度平均值作为当天的平均温度。
1.2.4有效授粉期
在两种雄株即将开花的大蕾期分别采摘其树冠外围中部的花蕾,到室内取下花药,用透明纸包好后埋于硅胶内,室温下干燥1 d,将散出的花粉收集于贴有标签的干燥小瓶内,置-80℃冰箱中保存备用。授粉前预先做低温贮藏对花粉生活力的影响检测,即取出部分花粉使其恢复到常温状态,采用固体培养基培养法测定软枣猕猴桃和美味猕猴桃花粉花粉生活力,培养基为10%蔗糖+100 mg/L硼酸+10 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+0.8%琼脂,pH值6.5,26 ℃条件下培养5 h。结果发现各亲本花粉发芽率均大于50%,可用于授粉。
授粉采用人工点授法。在‘天源红’花蕾完全露白期,在花期一致、花质均一的单花上进行预先套袋。按表1所列的时间,每天上午9:00~10:00,分别采用软枣猕猴桃和美味猕猴桃花粉进行授粉,每个时期每种花粉授粉花朵数均在30朵左右,授完粉后立即重新套袋,挂牌标记。记录授粉花朵数,于花后30 d调查坐果率。试验重复2次,取平均值。
1.2.5柱头可授性
按表1时间每天上午9:00,将软枣猕猴桃‘天源红’雌花的柱头完全浸泡在联苯胺-过氧
化氢反应液中(1%联苯胺∶3%过氧化氢∶水= 4 ∶11∶22,体积比),若柱头具有可授性则柱头周围的反应液呈现蓝色并伴有大量气泡出现,否则无气泡产生且不变蓝色,对比确定自然条件下柱头颜色的变化与柱头可授性[4]。每天检测20朵花上的20根花柱。
1.2.6有效受精期
1.2.6.1田间观测
在‘天源红’花蕾完全露白期,在花期一致、花质均一的单花上进行预先套袋。纸袋同上1.2.1。开花当天上午9 h进行软枣猕猴桃花粉人工授粉,授粉后套袋,并在授粉后按表2时间定时切取花朵的柱头、花柱的1/2和花柱的基部[5],不同时间每种处理花朵数为20~30朵,记录数据,在落花后30 d统计各处理的坐果率。重复2次,取平均值。
1.2.6.2花粉管行为的荧光观察
按上述1.2.6.1每次处理‘天源红’花朵的同时采集5朵花,用刀片从花柱基部(子房与花柱连接处)切取花柱(含柱头),每朵花取2根花柱,立即用FAA固定液固定。花柱的压片参照Kho等[6]的方法,从固定液中取出花柱,用蒸馏水冲洗2遍,用2 mol×L-1的NaOH放置在65 ℃的恒温箱中软化处理3 h,然后用0.1 mol×L-1K3PO4溶液配制的0.1 %的苯胺兰染色液染色3 h。把染色处理后的花柱做成压片,在日本OLYMPUS BX 51型荧光显微镜下观察花粉萌发和花粉管生长情况,选取典型图片拍照。由于猕猴桃的花柱较大,只能分段拍照,然后用photoshop软件调整照片对比度,拼接成完整花柱。
2.结果与分析
2.1花器官特征
‘天源红’花枝生于上年生枝的混合芽。根据雌花枝的长度,将其划分五种花枝类型:短缩花枝(0~5 cm),从基部到顶端均可着花;短花枝(5~10 cm),中花枝(10~30 cm),部分着花可达顶部,一般3~10节;长花枝(30~50 cm),徒长性花枝(50 cm以上),着花于枝条的中下部4~13节之间[7],其中短花枝、中花枝所占比例较高。
花序生于当年春季长出的花枝的叶腋间。花为雌花,腋生。单花或二歧聚伞花序,每花序有花1~3朵,辐状花冠。开放花朵直径(2.35±0.34)cm,花柄长(2.04±0.29)cm,花瓣白色、略有片状红晕,近圆形,基部相接,边缘无波皱,中间有一浅裂。花萼5~6片,偶有4片,绿略带红色,卵形。子房上位,瓶状,绿色,纵径长(2.68±0.18)mm,无毛。雄蕊多数,花药黄黑色,花粉粒空瘪,花丝退化或极短。单花花柱21~23个,长度(0.42±0.25)cm,白色,斜生或水平。柱头具有一道裂沟(图版I,1),表面有大量长圆柱形乳突细胞,无黏液分泌,表面纹理丰富(图版I ,2),顶端形状有钝圆、尖凸或凹陷三种形态(图版I ,3),这种表面形态结构有利于“嵌合”外来花粉。
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